قالب وردپرس درنا توس
خانه / تازه‌ها / بیوتکنولوژی / مروری بر آنتی بادیهای مونوکلونال

مروری بر آنتی بادیهای مونوکلونال

Moroori Bar Antibody Monoclonal

تصویر مفهومی از آنتی بادیها و آنتی ژنها، منبع: ساینس نیوز.

تینا تشکری: آنتی بادی‌های مونوکلونال، آنتی بادی‌هایی هستند که به طور طبیعی و یا تجربی توسط یک کلون خاص لنفوسیتی ساخته می‌شوند. این آنتی بادی‌ها تفاوت‌های زیاد با آنتی بادی‌های پلوکلونال دارند. از جمله اینکه تمام مولکول‌های آن‌ها از نظر قدرت اتصال و ویژگی اتصال ثابت و یکنواخت‌اند.

آنتی بادی مونوکلونال علیه آنزیم پراکسیداز دارای کاربردهای وسیعی است که از مهم‌ترین آن‌ها تشکیل کمپلکس ایمنی پراکسیداز-آنتی پراکسیداز (PAP) است. این کمپلکس در بسیاری از روش‌های رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی کاربرد دارد

آنزیم هورسرادیش پراکسیداز یک گلیکوپروتیین حاوی هسته هم است که آن را از ریشه ترب کوهی تهیه می‌کنند. این آنزیم دارای ۳۰۸اسید آمینه و ۸گروه کربوهیدرات و دارای وزن مولکولی حدود ۴۰۰۰۰دالتون است.  حداقل ۷ ایزوآنزیم مشخص از این آنزیم جدا و خالص سازی شده است. تکنیک‌های ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی امروزه در تحقیقات پایه و تشخیص‌ها بالینی، نقش مهمی ایفا می‌کنند. برای مثال در تشخیص انواع سرطان‌ها، نظیر لنفوم‌ها و لوسمی‌ها قابل استفاده‌اند.

همچنین در سیتولوژی تشخیص، ایمونو پاتولوژی پوست، تشخیص بیماریهای کلیوی و سایر بیماری‌ها کاربرد دارند. در واقع، هدف از این تکنیک‌ها، عموما این است که آنتی ژن خاصی را در بافت، شناسایی و ردیابی کنند و حتی موقعیت آن را مشخص کنند.

امروزه تکنیک‌های ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی، به دلیل کاربردهای فراوانشان اهمیت ویژه‌ای پیدا کرده‌اند. این تکنیک عموما در پاتولوژی، هیستولوژی، سیتولوژی، جنین‌شناسی، ایمونوپاتولوژی و غیره استفاده می‌شوند

روشهای APAAP یکی از متداول‌ترین و شناخته شده‌ترین این روشهاست که آنزیم آلکالین فسفاتاز در آن نقش کلیدی دارد. این آنزیم دارای سوبستراهای متعددی است که واکنش با برخی از آن‌ها، منجر به تولید محصولات رنگی می‌شود. بنابراین، این آنزیم به عنوان یک نشانگر در روشهای ایمونوشیمی مانند الایزا و ایمونو هیستوشیمی مثل روش APAAP قابل استفاده است

برای نشان دار کردن مولکول‌ها با این آنزیم، روش‌های متفاوتی وجود دارد که ابتدایی‌ترین آن‌ها کونژوگاسیون است. کونژوگه کردن آنتی بادی با آنزیم یا با مولکول‌های دیگر (نظیر آویدین-بیوتین) مستلزم صرف وقت بوده و به تجربه کافی نیاز دارد، به ویژه که در غالب موارد، این پروسه را باید در مورد تک تک آنتی بادی‌ها اعمال نمود

آنزیم آلکالین فسفاتاز از لحاظ منشا دارای تنوع بسیاروسیعی است و محققین مختلف از ALP‌هایی با منشاهای مختلف به منظور تولید آنتی بادی مونوکلونال استفاده کرده‌اند با توجه به اینکه آنزیم آلکالین فسفاتاز یک پروتىین درشت مولکول با وزنی حدود ۱۴۰کیلو دالتون، بااسیدهای آمینه حلقوی (نظیر تیروزین) است بنابراین ایمونوژیسته بالای آن چندان دور از انتظار نیست

یکی از تکنیک‌های ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی، سیستم آلکالین فسفاتاز-آنتی آلکالین فسفاتاز (APAAP) است که در آن، از آنزیم آلکالین فسفاتاز و واکنشش با سوبسترا، جهت ردیابی آنتی ژن‌ها استفاده می‌شود. در این روش به وسیله یک آنتی بادی مونوکلونال اولیه که به طور اختصاصی آنتی ژن‌های بافتی را تشخیص می‌دهد و کمپلکس APAAP اتصال برقرار می‌گردد. کمپلکس APAAP در واقع‌‌ همان کمپلکس ایمنی است که حاصل اتصال آلکالین فسفاتاز به آنتی بادی مونوکلونال ضدش است. با افزودن سوبسترا که تحت تاثیر واکنش آنزیمی به محصول رنگی تبدیل شده و رسوب می‌نماید محل تجمع آنتی ژن در بافت ردیابی می‌گردد.

برای تولید کمپلکس APAAP به آنتی بادی مونوکلونال بر علیه آنزیم آلکالین فسفاتاز نیاز است. آنتی بادی‌های مونوکلونال تفاوت‌های زیادی با آنتی سرم (آنتی بادی‌های پلی کلونال) دارند. این ترکیبات بیولوژیک که در حوزه‌های مختلف علوم بیولوژیک دارای کاربردهای فراوانی هستند، توسط سلولهای هیبریدومایی تولید شده و تمام مولکول‌های آن از نظر ویژگی ثابت و یکنواخت هستند. این خصوصیت آنتی بادی‌های مونوکلونال باعث می‌شود که کمپلکس APAAP تولید شده یکنواخت بوده و نتایج آزمایشات مختلفی که با آن انجام می‌شود تکرار پذیر باشد.

منابع

۱) علی اسدی، دکتر علی اکبر‌پور فتح الله، دکتر سید محمد موذنی (تولید آنتی بادی مونوکلونال علیه پراکسیداز) شماره: بهار ۱۳۷۹، دوره ۱۳، شماره ۶۲، صفحه۱ تا صفحه ۱۰

۲) محمد مهدی افتخاریان. سید محمد موذنی، علی اکبر‌پور فتح الله (تولید آنتی بادی مونوکلونال علیه آنزیم آلکالین فسفاتاز) شماره: پاییز ۱۳۸۲، دوره۵، شماره۱۹، صفحه ۱۲۹ تا صفحه ۱۳۶

تینا تشکری. مروری بر آنتی بادی های مونوکلونال. بنیاد تک، اردیبهشت ماه. http://taq.ir/1395/02/09/1370/

درباره حمید احمدیان مقدم

من به علوم و فناوری های نوین علاقه مند هستم!

این نوشته هم جالبه!

یماری کروهن

روشی نوین برای درمان بیماری کورهن با استفاده از باکتری‌ها

پژوهشگران دریافتند که آنزیم تولید شده توسط فلورمیکروبی نامتوازن در دستگاه گوارش انسان به بیماری …

پاسخ دهید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *